بررسی ارزيابي شناساگرهاي متابوليسم استخوان و تنش اكسيداتيو در موش هاي صحرايي هيپرليپيدميك درمان

ارزيابي شناساگرهاي متابوليسم استخوان و تنش اكسيداتيو در موش هاي صحرايي هيپرليپيدميك درمان شده با دوزاژ رايج و بالاي نياسين
چكيده
ارزيابي شناساگرهاي متابوليسم استخوان و تنش اكسيداتيو در موش هاي صحرايي هيپرليپيدميك درمان شده با دوزاژ رايج و بالاي نياسين
هدف از پژوهش حاضر ارزيابي تاثير احتمالي نياسين در مقادير رايج براي كاهش دادن ليپيدهاي سرمي و نيز مقادير بالا بر شناساگرهاي متابوليسم استخوان و تنش اكسيداتيو در موش هاي صحرايي هيپرليپيدميك بوده است. به اين منظور 24 سر موش صحرايي ماده  از نژاد Dawley - Sprague  به طور تصادفي به 4 گروه تقسيم و به شرح زير درمان شدند؛ گروه 1: (كنترل) جيره غذايي معمولي، گروه 2: به مدت 15 روز با جيره پر چرب حاوي 20% روغن آفتابگردان، 2% كلسترول و 5/0% اسيد كوليك و پس از آن تا روز 40 با جيره حاوي 10% روغن آفتابگردان، 1% كلسترول و 25/0 % اسيد كوليك، تغذيه شدند. گروه 3: جيره پر چرب (نظير گروه 2)+ نياسين 200 ميلي گرم بر كيلو گرم روزانه بصورت خوراكي با گاواژ (دوزاژ رايج) و گروه 4: جيره پر چرب (نظير گروه 2)+ نياسين با دوزاژ بالا (300 ميلي گرم بر كيلو گرم) روزانه خوراكي با گاواژ. لازم به ذكر است كه تجويز نياسين از روز 15 آغاز و تا پايان روز 40 ادامه يافت. در روز 15 از موش ها خونگيري و ميزان كلسترول تام و تري گليسريد سرمي اندازه گيري شد. در پايان دوره، خونگيري مجدد انجام و استخوان هاي ران راست و چپ خارج شد. درصد خاكستر استخوان ران چپ تعيين و از استخوان هاي ران راست به منظور اندازه گيري فعاليت آنزيم سوپر اكسيد ديسموتاز و نيز ميزان MDA استفاده شد. در ضمن ميزان كلسترول تام و تري گليسريد و PINP و CTX در سرم اندازه گيري شد.
مصرف جيره پرچرب موجب هيپركلسترولمي واضح در روز 15 گرديد كه در پايان دوره نيز مشهود بود. هرچند ميزان تري گليسريد سرمي تفاوت معني داري ميان گروهها نشان نداد. مصرف نياسين در گروه هاي 3 و 4 موجب كاهش ميزان كلسترول تام شد و حتي توانست آن را به سطح گروه كنترل برساند. ميزان PINP و CTX  و درصد خاكستر استخوان تفاوت معني داري در بين گروهها نداشت. فعاليت آنزيم سوپر اكسيد ديسموتاز در گروه 2 در مقايسه با كنترل افزايش و ميزان MDA كاهش يافت. تجويز نياسين در گروههاي 2 و 3 موجب افزايش فعاليت آنزيم سوپر اكسيد ديسموتاز در مقايسه با گروه 2 شد و در ضمن نياسين در دوزاژ رايج توانست كاهش محسوسي در ميزان  MDA  نسبت به گروه 2 ايجاد نمايد. در كل از مطالعه حاضر چنين بر مي آيد كه تجويز نياسين در دوزاژ رايج اثرات مطلوب قابل توجهي بر پارامترهاي تنش اكسيداتيو در استخوان موشهاي صحرايي هيپركلسترولميك دارد؛ بدون اينكه تاثير محسوسي بر شناساگرهاي متابوليسم استخوان داشته باشد.


فهرست مطالب
عنوان    صفحه
فصل اول: مقدمه و هدف  .........................................................................................................................................      1   

فصل دوم: كليات  ......................................................................................................................................................       3
     1-2- هيپرليپيدمي  ..........................................................................................................................................       3  
         1-1-2- تشخيص هيپرليپيدمي  ..............................................................................................................      3
         2-1-2- عوامل خطر براي هيپرليپيدمي  ...............................................................................................      3
         3-1-2- نشانه هاي باليني  .......................................................................................................................       4
         4-1-2-چگونگي آسيب رساندن به بدن  ...............................................................................................       4
         5-1-2- انواع هيپرليپيدمي  .....................................................................................................................       5
                 1-5-1-2- اوليه  ............................................................................................................................       5
                 2-5-1-2- ثانويه  ...........................................................................................................................       5     
         6-1-2- تشخيص  ......................................................................................................................................       6
                  1-6-1-2- ميزان كلسترول تام  ................................................................................................       6
          2-6-1-2- ميزان LDL-c  ..........................................................................................................        6
                  3-6-1-2- ميزان تري گليسريد  ..............................................................................................        7
                  4-6-1-2- ميزان  ………………………………………………………………..  HDL-c      7
                  5-6-1-2- ميزان بدون HDL-c  .............................................................................................        7
                  6-6-1-2- آزمون آپوليپو پروتئين B100  ..............................................................................        7
                7-6-1-2- CRP با حساسيت بالا (hs-CRP)  ......................................................................         8
                8-6-1-2- ليپو پروتئين a ..........................................................................................................         8
                9-6-1-2- آزمون آپوليپو پروتئين A1  ....................................................................................         9
                10-6-1-2- آزمون هاي ژنتيكي  .............................................................................................         9
        7-1-2- ملاحظات قبل از درمان  .........................................................................................................         9
        8-1-2- درمان  .........................................................................................................................................         9
                 1-8-1-2- تغيير در سبك زندگي  ........................................................................................          9
                 2-8-1-2- دارو درماني  ...........................................................................................................        10
   2-2- متابوليسم استخوان  .............................................................................................................................        18
       1-2-2- تنظيم متابوليسم استخوان  ....................................................................................................        19
               1-1-2-2- تعادل بين كلسيم و فسفر  ....................................................................................        19
      2-1-2-2- هورمون رشد  .............................................................................................................        20
               3-1-2-2- هورمون تيروئيد  .......................................................................................................        20
      4-1-2-2- استروژن و آندروژن  ...............................................................................................         21
      5-1-2-2- كورتيزول و گلوكوكورتيكوئيدهاي مرتبط  .......................................................         21
      6-1-2-2- فشار مكانيكي  .........................................................................................................        21
      7-1-2-2- وضعيت تغذيه ( لپتين)  ........................................................................................        22
        2-2-2- شناساگرهاي متابوليسم استخوان  .......................................................................................        22
      1-2-2-2- شناساگرهاي ساخت استخوان ..............................................................................        22
      2-2-2-2- شناساگرهاي تحليل استخوان  .............................................................................        22
       3-2-2- اختلالات متابوليسم استخواني  ...............................................................................................       23
      1-3-2-2- استئوپوروز  ................................................................................................................        23
    4-2- تنش اكسيداتيو ....................................................................................................................................        25
       1-3-2- شناساگرهاي تنش اكسيداتيو  ................................................................................................        25

فصل سوم: مواد و روش كار  ...............................................................................................................................        27
   1-3- وسايل و مواد مورد استفاده  ...............................................................................................................        27
   2-3- طرح آزمون  ...........................................................................................................................................        29
   3-3- روش كار  ................................................................................................................................................        29  
      1-3-3- خونگيري  .....................................................................................................................................        29
      2-3-3- درمان با نياسين  ........................................................................................................................        30
      3-3-3- برداشت استخوان ران راست و چپ  ......................................................................................        30
      4-3-3- تعيين وزن و درصد خاكستر استخوان هاي ران چپ  .......................................................        30
      5-3-3- اندازه گيري كلسترول تام  .......................................................................................................        30
       1-5-3-3- آماده سازي نمونه ها  ................................................................................................        30
     2-5-3-3- اندازه گيري كلسترول تام با استفاده از كيت كلسترول  ...................................         31
      6-3-3- اندازه گيري تري گليسريد سرم  ............................................................................................         31
             1-6-3-3- آماده سازي نمونه ها  ................................................................................................         31
      2-6-3-3- اندازه گيري تري گليسريد با استفاده از كيت تري گليسريد  ..........................         31
      7-3-3- اندازه گيري فعاليت آنزيم سوپر اكسيد ديسموتاز ................................................................        32
             1-7-3-3- آماده سازي نمونه ها   ................................................................................................        32
  2-7-3-3- اندازه گيري فعاليت آنزيم  .........................................................................................        33
     8-3-3- اندازه گيري آنزيم مالون دي آلدهيد (MDA)  .....................................................................        35
  1-8-3-3- آماده سازي نمونه ها  ..................................................................................................        35
  2-8-3-3- اندازه گيري  ..................................................................................................................        35
     9-3-3- اندازه گيري ميزان PINP  .........................................................................................................        36 
            1-9-3-3- اماده سازي نمونه ها  ....................................................................................................        36
            2-9-3-3- اندازه گيري ميزان PINP با روش اليزا  ............................................................       36
         10-3-3- اندازه گيري ميزان CTX  ....................................................................................................       38
         11-3-3- آناليز اماري داده ها  .............................................................................................................       39
فصل چهارم: نتايج  .................................................................................................................................................      40
1-4- پارامترهاي ليپيدي سرم  .................................................................................................................       40
         1-1-4- ميزان كلسترول تام سرم  ......................................................................................................       40
         2-1-4- ميزان تري گليسريد سرم .......................................................................................................       41
     2-4- شناساگرهاي متابوليسم استخوان  ..................................................................................................       41
         1-2-4- ميزان PINP و CTX سرم  ....................................................................................................       41
     3-4- پارامترهاي تنش اكسيداتيو  .............................................................................................................       42
        1-3-4- ميزان فعاليت آنزيم SOD و ميزان MDA  .....................................................................       42
     4-4- ميزان درصد خاكستر ..........................................................................................................................       42
     5-4- وزن موش ها در اول و پايان دوره  ....................................................................................................      43 

فصل پنجم: بحث و نتيجه گيري  ........................................................................................................................      44
 
فهرست منابع و مآخذ  ............................................................................................................................................      48
فهرست جداول
عنوان                                                                                                                                  صفحه
جدول 1-4-  .........................................................................................................................................................        40
جدول 2-4-  .........................................................................................................................................................        41
جدول 3-4-  .........................................................................................................................................................        41
جدول 4-4-  ........................................................................................................................................................         42
جدول 5-4-  ........................................................................................................................................................         42
جدول 6-4-  ........................................................................................................................................................         43